مقاله پژوهشی جایگزینی خوراک تجاری با لارو مگس سیاه سرباز تازه (Hermetia illucens) 

در میگوی سفید اقیانوس آرام (Litopenaeus vannamei)

این مطالعه بقای عملکرد رشد، فعالیت آنزیم های گوارشی، بافت شناسی روده و فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی میگوی سفید اقیانوس آرام (Litopenaeus vannamei) را که با پنج رژیم غذایی مختلف حاوی 0٪، 25٪، 50٪، 75٪ و 100% لارو مگس سرباز سیاه تازه (BSFL)تغذیه شده بود، را ، به ترتیب، برای جایگزینی خوراک تجاری با وزن مساوی، ارزیابی کرد. 

یوهانگ ه، 1،2 شین لیو، 1 نایدا ژانگ، 1 سیزه وانگ، 1 آئولین وانگ، 1 رانتائو زو، 1،3 و یوشنگ جیانگ 1

1 تیم نوآوری برای آبزی پروری سخت پوستان و ذخیره سازی مجدد، دانشگاه اقیانوس دالیان، دالیان 116023، چین

2 موسسه تحقیقات شیلات گرمسیری سانیا، سانیا 572018، چین

3 آزمایشگاه کلیدی پرورش و تقویت ذخایر در دریای چین شمالی (وزارت کشاورزی و امور روستایی)، دانشگاه اقیانوس دالیان، دالیان 116023، چین

مکاتبات باید به Rantao Zuo ارسال شود. این آدرس ایمیل توسط spambots حفاظت می شود. برای دیدن شما نیاز به جاوا اسکریپت دارید و یوشنگ جیانگ؛ این آدرس ایمیل توسط spambots حفاظت می شود. برای دیدن شما نیاز به جاوا اسکریپت دارید دریافت 26 اکتبر 2021; بازبینی شده در 23 نوامبر 2021؛ پذیرش در 29 نوامبر 2021؛ منتشر شده در 8 فوریه 2022 ویرایشگر آکادمیک: Erchao Li

حق چاپ © 2022 Yuhang He et al. این یک مقاله با دسترسی آزاد است که تحت مجوز Creative Commons Attribution توزیع شده است که استفاده، توزیع و تکثیر نامحدود را در هر رسانه‌ای مجاز می‌سازد، مشروط بر اینکه اثر اصلی به درستی ذکر شده باشد.

آزمایش کشت به مدت 45 روز به طول انجامید و نتایج نشان داد که نرخ بقا (SR)، وزن نهایی بدن (FBW) و افزایش وزن (WG) با نرخ جایگزینی BSFL تازه در رژیم غذایی، که در آن حداکثر مقدار در گروه BSFL 25٪ یافت شد، در حالی که حداقل مقدار در گروه BSFL 100٪ ظاهر شد. هنگامی که سطح جایگزینی BSFL برابر یا بالاتر از 75٪ بود، SR، FBW و WG به طور قابل توجهی کاهش یافت. با این حال، شاخص کبدی (HSI) با افزایش سطح جایگزینی BSFL افزایش یافت، که به طور قابل توجهی در گروه های BSFL 75% و BSFL 100% نسبت به سایر گروه ها بیشتر بود. هیچ تفاوت معنی داری در فعالیت آمیلاز و لیپاز کبدی میگو در بین همه گروه ها مشاهده نشد. با این حال، در مقایسه با گروه کنترل، فعالیت پروتئاز در کبد پانکراس میگو زمانی که تا 25 درصد از خوراک تجاری جایگزین شد، به طور قابل توجهی بالاتر بود. ساختار بافتی روده به تدریج از نظر پاتولوژیک، مانند اختلال بافت، با افزایش نسبت BSFL تازه در رژیم غذایی تغییر کرد. کاهش قابل توجهی در ارتفاع چین خوردگی روده در گروه BSFL 100% مشاهده شد و کاهش ضخامت عضلانی روده نیز در تمام گروه‌های درمان مشاهده شد. 

فعالیت های SOD و GSH-PX سرم میگو در تمام گروه های تیمار به طور قابل توجهی بیشتر از گروه کنترل بود. در نتیجه، جایگزینی خوراک تجاری تا 50٪ با BSFL تازه می تواند برای پرورش L. vannamei زمانی که عملکردهای رشد، فعالیت آنزیم های گوارشی، بافت شناسی روده و آنزیم های آنتی اکسیدانی در نظر گرفته شود، امکان پذیر باشد.

1. معرفی
میگوی سفید اقیانوس آرام Litopenaeus vannamei مهمترین گونه پنهید پرورشی در سراسر جهان است که تولید جهانی آن بیش از 3 میلیون تن در سال است. در حال حاضر، بیش از 90 درصد میگوهای پرورشی متکی به رژیم های غذایی با پروتئین بالا حاوی درصد بالایی از پودر ماهی (FM) هستند که به دلیل محتوای پروتئین بالا، اسید آمینه متعادل، منبع اصلی پروتئین در خوراک آبزیان صنعتی برای دهه ها بوده است. ترکیب موقعیت، و خوش طعمی بالا [1-3]. با این حال، عرضه پودر ماهی نمی تواند نیازهای روزافزون یک صنعت در حال شکوفایی آبزی پروری را به دلیل کاهش روزافزون صید وحشی برآورده کند. یافتن منبع پروتئینی جایگزین با تغذیه بالا، قابلیت هضم آسان، عرضه پایدار و هزینه کم به یکی از تمرکزهای صنعت آبزی پروری تبدیل شده است (Tacon & Metian [4]). انواع پروتئین‌های گیاهی تجدیدپذیر برای کاهش نسبت پودر ماهی دریایی مورد استفاده در رژیم غذایی میگو، با در نظر گرفتن هزینه خوراک مورد ارزیابی قرار گرفته‌اند [5].
به طور کلی، مشخص شد که درصد بالایی از پروتئین های گیاهی مانند کنجاله لوپین [6]، کنجاله ریز جلبک های بدون چربی [7]، کنجاله بادام زمینی [8] و رژیم های غذایی مبتنی بر سویا [9] باعث کاهش مصرف خوراک و سرعت رشد در حیوانات دنباله دار به دلیل پروفایل نامتعادل اسید آمینه، کمبود یک یا چند اسید آمینه ضروری، یا وجود برخی از عوامل ضد تغذیه در مقایسه با پودر ماهی ایجاد می گردد[10-12].
حشرات معمولاً دارای ظرفیت بیولوژیکی برای تبدیل مواد آلی با کیفیت پایین به پروتئین حیوانی با کیفیت بالا با هزینه کمتر کشت آب، زمین و غیره و با انتشار گازهای گلخانه ای کمتر هستند (Huis & [13]). رایج ترین حشرات یا لاروهای آنها که به عنوان منبع پروتئین کشت می شوند عبارتند از کرم زردآلو Tenebrio molitor و مگس خانگی Musca domestica. در مقایسه با منابع پروتئینی گیاهان، حشرات با محتوای پروتئین نسبتاً بالاتر، اسید آمینه متعادل تر و خوش طعمی بهتر مشخص می شوند. مگس سیاه سرباز Hermetia illucens به عنوان یکی از امیدوارترین گونه های حشرات برای تولید تجاری تصور می شد [14]. و لارو مگس سرباز سیاه (BSFL) در پروتئین ها (تقریباً 42٪) با پروفایل اسید آمینه نسبتاً متعادل و لیپیدها به ویژه اسیدهای چرب غیراشباع فراوان است [15، 16]. مشخص شده است که کنجاله BSFL برای عملکرد رشد ماهی کپور جوان Cyprinus carpio var مفید است. جیان [17]، میگو L. vannamei [5] و سالمون اقیانوس اطلس سالمو سالار [18]. جالب توجه است، BSFL همچنین یک فعالیت ضد میکروبی نشان داد، که می تواند یک روش بالقوه برای جلوگیری و کنترل شیوع بیماری ها و کاهش استفاده از آنتی بیوتیک ها در آبزی پروری باشد [19-21].
اخیراً، مطالعاتی برای ارزیابی اثرات کنجاله BSFL جایگزین کنجاله ماهی در خوراک فرموله شده بر عملکرد رشد L.vannamei انجام شده است [5]. با این حال، این روش متداول باید ابتدا انرژی بیشتری مصرف کند و دی اکسید کربن تولید کند تا کنجاله حشرات به دست آید و اجتناب ناپذیر است که فعالیت های زیستی برخی از اجزای غذایی را از بین می برد. 
بنابراین، ارزیابی اینکه آیا BSFL تازه می تواند به میگو L. vannamei تغذیه شود یا خیر و جایگزینی خوراک های تجاری با نسبت مناسب ضروری است.
همچنین می تواند راهی بالقوه برای تامین برخی از مواد مغذی خاص مانند ویتامین ها یا آستاگزانتین برای میگو باشد که معمولاً در برابر دمای بالا، نور قوی و غیره در طول دوره پردازش و نگهداری حساس و آسیب پذیر است. در کار حاضر، آزمایش‌هایی برای بررسی اثرات BSFL تازه بر بقا، عملکرد رشد، فعالیت آنزیم‌های گوارشی، بافت‌شناسی روده و فعالیت‌های آنزیم آنتی‌اکسیدان سرم L. vannamei انجام شد تا امکان‌سنجی استفاده از BSFL تازه ارزیابی شود. خوراک زیستی برای جایگزینی خوراک تجاری و ارائه استراتژی های تغذیه بیشتر برای پرورش میگو.

2. مواد و روش
2.1. رژیم تغذیه در این آزمایش از خوراک تجاری (پروتئین خام: 42 درصد و چربی خام: 6 درصد) به عنوان رژیم غذایی کنترل استفاده شد. سپس درصدهای مختلف (25%، 50%، 75% و 100%) از خوراک تجاری با BSFL تازه جایگزین شد. 
ترکیب تقریبی خوراک تجاری و BSFL تازه در جدول 1 فهرست شده است. استراتژی تغذیه و ترکیب نظری تقریبی جیره های مصرف شده برای هر تیمار در جدول 2 نشان داده شده است.
 
جدول 1: ترکیب تقریبی خوراک تجاری و BSFL تازه (% وزن).

ترکیب تقریبی خوراک تجاری تازه BSFL
پروتئین خام 42 17.8
خاکستر خام 16 2.2
لیپید خام 4 7.4
فسفر 1.2 0.3
رطوبت و سایر مواد فرار 11 69.3
نکات: تخم‌های مگس سرباز سیاه توسط تیم ما از تخم بیرون آمدند و لاروها به طور منظم با سبوس (سبوس 3: آب 1) هر روز تغذیه می‌شدند. خوراک میگوهای تجاری از یک فروشنده محلی خریداری شد.

2.2. آزمایش تغذیه پست لارو L. vannamei (مرحله PL5 با طول بدن 0.4-0.5 سانتی متر) از یک جوجه کشی تجاری در استان هاینان چین خریداری شد و برای بچه ها با طول بدن 0:23 ± 3:27 سانتی متر کشت شد. سپس افراد سالم با اندازه مشابه انتخاب و در مخازن 400 لیتری الیاف شیشه ای و 300 لیتر آب دریا توزیع شدند. میگوها به مدت 7 روز در مخزن سازگار شدند و سپس به طور تصادفی به 15 تانک با تراکم 50 نفر در هر تانک تقسیم شدند. در هر گروه سه تکرار حفظ شد. میگوها چهار بار در روز (6: 00، 12: 00، 18: 00 و 24: 00) و هر بار تا یک سیر بصری تغذیه می شدند. خوراک و مدفوع باقیمانده دو بار در روز از طریق یک لوله فاضلاب در پایین از مخزن تخلیه می شد و سپس آب تمیز با تبادل آب روزانه حدود 30 درصد از حجم کل پر می شد. این آزمایش به مدت 45 روز به طول انجامید. در طول آزمایش، دمای آب، شوری و اکسیژن محلول به ترتیب در 3 ± 28 درجه سانتیگراد، 2 ± 27 و بالاتر از 5.0 میلی گرم در لیتر حفظ شد.

2.3. مجموعه نمونه میگو. در پایان آزمایش،
میگوها قبل از نمونه برداری به مدت 12 ساعت گرسنگی داده شدند و سپس از هر مخزن خارج و به صورت جداگانه توزین شدند. همولنف از پنج میگو در هر مخزن جمع آوری و با محلول ضد انعقاد (1: 1) مخلوط شد و به مدت 6 ساعت در دمای 4 درجه سانتی گراد نگهداری شد. سرم جدا شده با سانتریفیوژ کردن (3000 دور در دقیقه، 10 دقیقه) برداشته شد و فوراً در 80- درجه سانتیگراد برای تجزیه و تحلیل فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی ذخیره شد. پس از آن، هپاتوپانکراس سه میگو از هر مخزن جدا شد و در یک لوله استریل جمع شد، فلاش منجمد شد و در دمای 80- درجه سانتی گراد برای تجزیه و تحلیل بعدی فعالیت آنزیم های گوارشی ذخیره شد. در نهایت، روده ها جمع آوری و در فرمالین 10 درصد بافر شده برای بررسی بافت شناسی تثبیت شدند.

2.4. سنجش فعالیت آنزیم های گوارشی و آنزیم های آنتی اکسیدانی. هپاتوپانکراس در آب مقطر یخ سرد به نسبت 1: 9 (w/v) همگن شدند. پس از سانتریفیوژ کردن (2500 × گرم، 10 دقیقه، 4 درجه سانتیگراد)، مواد رویی جدا شده و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری شدند. فعالیت های پروتئاز، لیپاز و آمیلاز مطابق دستورالعمل کیت های تجاری موجود (نانجینگ جیانچنگ بیوتکنولوژی، نانجینگ، چین) آنالیز شد. غلظت پروتئین عصاره های آنزیمی با استفاده از روش برادفورد [22] اندازه گیری شد.
فعالیت سوپراکسید دیسموتاز (SOD)، کاتالاز (CAT) و گلوتاتیون پراکسیداز (GSH-PX) در سرم توسط کیت های سنجش تجاری به دنبال دستورالعمل های سازنده (Nanjing Jiancheng biotech. Co, Nanjing, China) مورد بررسی قرار گرفتند.

جدول 2: استراتژی تغذیه و ترکیب تقریبی جیره های آزمایشی.

رژیم های غذایی را آزمایش کنید
BSFL 0% BSFL 25% BSFL 50% BSFL 75% BSFL 100%
زمان تغذیه (بار در روز)
خوراک تجاری 4 3 2 1 0
تازه BSFL 0 1 2 3 4
ترکیب تقریبی (% وزن)
پروتئین خام 42.00 35.95 29.90 23.85 17.80
خاکستر خام 16.00 12.55 9.10 5.65 2.20
چربی خام 4.00 4.85 5.70 6.55 7.40
فسفر 1.20 0.98 0.75 0.53 0.30
رطوبت و سایر مواد فرار 11.00 25.58 40.15 54.73 69.30
نکات: BSFL 0% گروه کنترل است. نرخ جایگزینی با تنظیم زمان تغذیه BSFL تازه کنترل شد.

2.5. بررسی بافت شناسی ساختار روده.
نمونه های روده ثابت در یک سری اتانول درجه بندی شده آبگیری شدند، در پارافین جاسازی شده و برش داده شدند. مقاطع به مدت 3-5 دقیقه با محلول هماتوکسیلین رنگ آمیزی شدند و با آب مقطر شسته شدند و سپس به ترتیب با محلول تمایز هماتوکسیلین و هماتوکسیلین اسکات تپ بلوینگ تیمار شدند و پس از هر مرحله شستشو داده شدند. پس از آن، مقاطع با اتانول 85 درصد به مدت 5 دقیقه و اتانول 95 درصد به مدت 5 دقیقه آبگیری شدند و به مدت 5 دقیقه با رنگ ائوزین رنگ آمیزی شدند. در نهایت، نمونه‌ها با میکروسکوپ نوری (100×) عکس‌برداری شدند و درجه تغییر ارتفاع چین روده و ضخامت عضلانی توسط CaseViewer 2.1 ارزیابی شد. پنج چین سالم برای هر بخش با اندازه گیری ارتفاع (μm) و ضخامت عضلانی (μm) انتخاب شد.
2.6. محاسبات و تجزیه و تحلیل آماری. افزایش وزن (WG)، شاخص کبدی (HSI) و میزان بقا (SR) میگو بر اساس فرمول زیر محاسبه شد:

(به متن انگلیسی مراجعه شود)

از آنالیز واریانس یک طرفه (ANOVA) برای آزمایش اثرات دستکاری رژیم غذایی استفاده شد. همه داده ها برای توزیع نرمال و همگنی واریانس مورد آزمایش قرار گرفتند. اگر معنی‌داری تشخیص داده شد، از مقایسه‌های چندگانه آزمون LSD برای مقایسه میانگین‌ها بین گروه‌ها استفاده شد. تمامی تجزیه و تحلیل های آماری با استفاده از نرم افزار SPSS23 انجام شد. سطح تفاوت معنی دار در P <0:05 انتخاب شد و ضخامت عضلانی روده به میزان قابل توجهی در مقایسه با گروه کنترل کاهش یافته است (P <0:05).
3. نتایج
3.1. عملکرد بقا و رشد.
نتایج جدول 3 نشان داد که میزان بقا (SR)، وزن نهایی بدن (FBW) و افزایش وزن (WG) با نرخ جایگزینی BSFL تازه در رژیم غذایی رابطه منفی دارد، جایی که حداکثر مقدار در BSFL 25 یافت شد. گروه ٪، در حالی که حداقل مقدار در گروه BSFL 100٪ ظاهر شد. هنگامی که سطح جایگزینی BSFL برابر یا بالاتر از 75٪ بود، SR، FBW و WG به طور قابل توجهی کاهش یافتند. با این حال، HSI به طور قابل توجهی با افزایش سطح جایگزینی BSFL افزایش یافت، که به طور قابل توجهی در گروه های BSFL 75٪ و BSFL 100٪ نسبت به گروه کنترل بیشتر بود (P <0:05).
3.2. فعالیت آنزیم های گوارشی فعالیت لیپاز هپاتوپانکراس و آمیلاز میگو به طور قابل توجهی تحت تاثیر سطح جایگزینی BSFL قرار نگرفت (P>0:05). حداکثر مقدار فعالیت پروتئاز کبدی در گروه BSFL 25 درصد، با تفاوت های معنی داری در مقایسه با گروه های کنترل (P <0:05) و هیچ تفاوت معنی داری در پروتئاز هپاتوپانکراس سایر گروه های جایگزین BSFL وجود نداشت (P > 0:05) (جدول 4).
 
3.3. ساختار بافت شناسی روده
بخش های بافت شناسی از شاخص کبدی ðHSI، %Þ روده میگو نشان داد که ارتفاع چین روده و ضخامت عضلانی با افزایش سطح جایگزینی BSFL کاهش می یابد. زمانی که سطح جایگزینی BSFL برابر بود و ارتفاع چین های روده ای در گروه BSFL 100% به طور قابل توجهی کمتر از سایر گروه ها بود (P <0:05) (جدول 5).
ساختار بافتی روده میگو در گروه BSFL 100% به شدت آسیب دیده بود که با مخاط شکسته، چین های مختل و علائم واضح التهاب روده، مانند افزایش واکوئل شدن سیتوپلاسمی، آسیب، و از دست دادن ظاهر شد. یکپارچگی اپیدرم (شکل 1).

جدول 3: عملکرد رشد و بقای L. vannamei تغذیه شده با جیره های حاوی سطوح مختلف BSFL به مدت 45 روز.
اقلام رژیم غذایی

به متن انگلیسی مراجعه شود.
مقادیر ارائه شده به عنوان میانگین ± SE نمونه ها. مقادیر هر پارامتر در یک ردیف با بالانویس های مختلف به طور قابل توجهی متفاوت است (P <0:05).

جدول 4: فعالیت آنزیم های گوارشی L. vannamei تغذیه شده با جیره های حاوی سطوح مختلف BSFL به مدت 45 روز.
رژیم های غذایی فعالیت آنزیمی

به متن انگلیسی مراجعه شود.
مقادیر به صورت میانگین ± SE نمونه ها ارائه شده است. مقادیر هر پارامتر در همان سطر با بالانویس های مختلف به طور قابل توجهی متفاوت است (P <0:05).

جدول 5: بافت شناسی روده L. vannamei تغذیه شده با جیره های حاوی سطوح مختلف BSFL به مدت 45 روز.
پارامترهای رژیم غذایی

به متن انگلیسی مراجعه شود.
مقادیر به صورت میانگین ± SE نمونه ها ارائه شده است. مقادیر هر پارامتر در همان سطر با بالانویس های مختلف به طور قابل توجهی متفاوت است (P <0:05).

 
3.4. فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی هر دو فعالیت SOD و GSH-PX در میگوهای گروه های تیمار به طور قابل توجهی بیشتر از گروه کنترل بود (P <0:05). با افزایش سطح جایگزینی BSFL، فعالیت آنزیم آنتی اکسیدانی سرم ابتدا روند افزایشی و سپس کاهشی را نشان داد. حداکثر مقدار برای فعالیت SOD در گروه BSFL 25٪ و حداکثر مقدار برای فعالیت GSH-PX در گروه BSFL 50٪ مشاهده شد. فعالیت CAT سرم به طور قابل توجهی در بین همه گروه ها متفاوت نبود (جدول 6).

4. بحث
4.1. اثرات تغذیه BSFL بر عملکرد رشد L. vannamei.  نشان داد که جایگزینی BSFL تازه برای نسبت مناسبی از خوراک تجاری هیچ تأثیر منفی قابل توجهی بر عملکرد رشد و میزان بقا در L. vannamei نداشت. علاوه بر این، با مشاهده بصری، واضح بود که میگوها در هر گروه به طور فعال و سریع حرکت می کنند و پس از تغذیه به سمت BSFL شنا می کنند، که نشان می دهد BSFL تازه برای حیوان خوش طعم و جذاب است. نتایج مشابهی در گربه زرد Pelteobagrus ful-vidraco [23]، خرچنگ Cherax cainii [24] و قزل آلای رنگین کمان Oncorhynchus mykiss [25] یافت شد، جایی که جایگزینی نسبی کنجاله ماهی با کنجاله BSFL در جیره های غذایی قابل مقایسه نبود. با این حال، برخی از مطالعات نشان داد که رشد و استفاده از خوراک حیوانات آبزی، زمانی که رژیم غذایی ماهی با پودر BSFL جایگزین شد،  به طور قابل توجهی کاهش می یابد.
این نتایج ممکن است به دلیل تفاوت در گونه های جانوران آبزی، اندازه، یا غذا و روش پردازش برای حشرات باشد [26]. در مورد میگوی سفید اقیانوس آرام L. vannamei، هیچ اثر آشکاری بر افزایش وزن، کارایی غذا و میزان بقا یافت نشد زمانی که وعده غذایی ماهی جایگزین شده با غذای BSFL بیش از 60٪ نبود [5]. مهمتر از همه، استفاده از غذای تازه BSFL یا BSFL برای جایگزینی خوراک های تجاری در آبزی پروری امکان پذیر است.
در این کار، عملکرد رشد و نرخ بقای میگو به طور قابل توجهی کاهش یافت زیرا سطح جایگزینی BSFL برابر یا بالاتر از 75٪ بود. این ممکن است به دلیل مصرف ناکافی پروتئین باشد، زمانی که خوراک های تجاری با BSFL خارج از محدوده بهینه جایگزین شدند. مطالعات زیادی برای بررسی نیازهای پروتئینی L. vannamei انجام شده است و حد پایین سطح پروتئین جیره برای این گونه حدود 30 درصد است [27]. عملکرد رشد میگو زمانی که سطح پروتئین جیره کمتر از 37.11 درصد بود به طور قابل توجهی کاهش یافت [28].
علاوه بر این، محتوای چربی جیره می تواند بر رسوب چربی در کبد پانکراس حیوانات آبزی تأثیر بگذارد [29]. BSFL تازه دارای محتوای چربی بالاتری نسبت به خوراک های تجاری است، که منجر به محتوای چربی به طور قابل توجهی بالاتر در کبد پانکراس میگو از گروه های BSFL 75% و BSFL 100% در مقایسه با گروه خوراک تجاری شد. افزایش مصرف لیپید می تواند دلیل افزایش شاخص کبدی در میگو با افزایش سطح جایگزینی BSFL باشد. سطح لیپید مناسب نه تنها باعث افزایش کارایی خوراک و صرفه جویی در پروتئین می شود، بلکه سیستم ایمنی حیوانات آبزی را بهبود می بخشد[30-32]. 
مطالعات قبلی نشان می‌دهد که عملکرد رشد سوق‌ماهی جوان Scophthalmus maximus به طور قابل‌توجهی با افزایش سطح لیپید رژیم غذایی بهبود یافته است [33]. 
رژیم با 9.69٪ -13.75٪ چربی خام می تواند فعالیت CAT و GSH-PX L. vannamei را افزایش دهد [34]. با این حال، عملکرد رشد و پاسخ ایمنی به دلیل اینکه سطح لیپید رژیم غذایی از محدوده بهینه فراتر رفت، سرکوب شد [35].

شکل 1: بخش های روده به دست آمده از میگوهای تغذیه شده با (الف) BSFL 0٪، (ب ) BSFL 25٪، (ج) BSFL 50٪، (د) BSFL 75٪، و BSFL 100٪. R: ضخامت عضلانی؛ V: ارتفاع تاشو؛  مختصات اندازه گیری = 50 میکرومتر.

 جدول 6: فعالیت آنزیم آنتی اکسیدانی L. vannamei تغذیه شده با جیره های حاوی سطوح مختلف BSFL به مدت 45 روز.
رژیم های غذایی آنزیم های آنتی اکسیدانی

به متن انگلیسی مراجعه شود.
مقادیر به صورت میانگین ± SE نمونه ها ارائه شده است. مقادیر هر پارامتر در همان سطر با بالانویس های مختلف به طور قابل توجهی متفاوت است (P <0:05).

 
4.2. اثرات تغذیه BSFL بر فعالیت آنزیم گوارشی L. vannamei. به خوبی شناخته شده است که اسکلت بیرونی حشرات سرشار از کیتین است. بسیاری از مطالعات نشان داده اند که کیتین عملکرد رشد و قابلیت هضم را در سخت پوستان افزایش می دهد. خرچنگ مزرعه برنج Esanthelphusa dugasti با رژیم غذایی حاوی 2 درصد کیتین عملکرد رشد و نرخ بقای بهتری را نشان داد [36]. میگوهای تغذیه شده با رژیم غذایی مکمل با کیتین، میزان بقا، عملکرد رشد و توانایی تحمل استرس بالاتری را نشان دادند [37]. رژیم غذایی حاوی 5 درصد کیتین باعث بهبود قابلیت هضم پروتئین و لیپید و عملکرد رشد میگوی ببری Penaeus monodon شد [38]. افزودن دوز کم کیتوزان در رژیم غذایی می تواند به طور موثری فعالیت پروتئاز هپاتوپانکراس L. vannamei را افزایش دهد [39]. در کار حاضر، فعالیت پروتئاز میگوی تغذیه شده با BSFL 50 درصد به طور قابل توجهی بالاتر از گروه کنترل بود که ممکن است به کیتین از پوسته حشره نسبت داده شود. شایان ذکر است که مصرف پروتئین روزانه میگو در گروه BSFL 50% تنها حدود 60% از آن در گروه کنترل بود، که نشان می‌دهد افزایش فعالیت پروتئاز می‌تواند کارایی پروتئین را بهبود بخشد و عملکرد رشد قابل مقایسه‌ای را در میگو از گروه BSFL 50% و گروه شاهد.

4.3. اثرات تغذیه BSFL بر بافت شناسی روده L. vannamei. بخش بافت شناسی نشان داد که جایگزینی بیشتر BSFL تازه در جیره به ساختار روده میگو آسیب می رساند. همانطور که می دانیم روده یکی از اصلی ترین اندام های گوارشی است و نقش مهمی در فرآیند دفع دارد که می تواند یک علامت زیستی برای سلامتی یک میگو باشد. فیبر غذایی بر حرکت ذرات غذا در طول دستگاه گوارش تأثیر می گذارد، با این حال، فیبر غذایی بیشتر ممکن است منجر به اختلال در جذب مواد مغذی شود. در این کار، کیتین از BSFL همچنین می‌تواند حرکت مواد مغذی را در طول دستگاه گوارش کند کند و اثرات منفی بر هضم و فعالیت‌های جذب در حیوان داشته باشد [38]. کنجاله BSFL بدون چربی اضافه شده به رژیم غذایی همچنین باعث آسیب روده به ماهی کپور C. carpio var. جیان [17]. مطالعات مشابه نشان داد که عملکرد رشد L.vannamei کاهش یافته و ساختار بافتی روده با افزایش وعده غذایی BSFL در جیره ها مختل شده است که می تواند به دلیل افزایش کمبود اسید آمینه ضروری و نامتعادل EAA/NEAA باشد [5]. مطالعات قبلی نشان داد که کمبود اسید آمینه در جیره های گیاهی می تواند بر اپیتلیوم روده ماهی تأثیر منفی بگذارد [40]. بنابراین، می‌تواند یک مکانیسم پیچیده تحت این پدیده در مورد آسیب بافت‌شناسی ناشی از تغذیه بیش از حد با BSFL تازه در روده میگو وجود داشته باشد که به تحقیقات بیشتری نیاز دارد.
 
4.4. اثرات تغذیه BSFL بر فعالیت آنزیم آنتی اکسیدانی L. vannamei. استرس اکسیداتیو زمانی رخ داد که تعادل بین گونه‌های فعال اکسیژن (ROS) و ظرفیت آنتی‌اکسیدانی مختل شد که منجر به برخی اثرات مخرب روی حیوانات شد [41]. استرس اکسیداتیو در موجودات آبزی در طول استرس تغذیه ای منعکس کننده تر است [42]. آنزیم های آنتی اکسیدان نقش محافظتی سلولی اصلی در برابر استرس اکسیداتیو را ایفا کردند، که در آن آبشار آنزیم SOD-CAT-GSH-PX اولین خط دفاعی در برابر ROS را نشان می دهد [43، 44]. در مطالعه حاضر، فعالیت بیشتر قابل توجه آنزیم های آنتی اکسیدانی در سرم میگوهای تغذیه شده با جیره های BSFL مشاهده شد. این مطابق با مطالعه قبلی [23] بود، که در آن فعالیت SOD در سرم P. fulvidraco گربه زرد با سطح مناسبی از کنجاله BSFL مکمل شده در خوراک افزایش یافت. علاوه بر این، فعالیت CAT در ماهی کپور C. carpio var. جیان همچنین با اضافه شدن وعده غذایی BSFL بدون چربی به رژیم غذایی آنها افزایش یافت [17]. برخی از کارهای تحقیقاتی همچنین نشان دادند که کیتین و مشتقات آن می توانند فعالیت های آنتی اکسیدانی داشته باشند و پاسخ ایمنی را تقویت کنند [45، 46]. کیتین استخراج شده از حشرات مشخص شد که خواص آنتی اکسیدانی آشکار و فعالیت ضد باکتریایی را در برابر میکروارگانیسم های بیماری زا نشان می دهد [47]. این می تواند نتایج مربوط به فعالیت های بالاتر قابل توجه آنزیم های آنتی اکسیدان را برای میگوهای تغذیه شده با رژیم های غذایی BSFL در دوره قبلی آزمایش توضیح دهد. با این حال، برخی تحقیقات نشان داد که میگوهای تغذیه شده با رژیم غذایی با سطح لیپید بالای 14 درصد MDA بیشتری در همولنف تولید می کنند که منجر به اثرات منفی بر سیستم ایمنی می شود [34]. در این کار، مصرف روزانه چربی میگو با افزایش سطح جایگزینی BSFL در جیره‌ها افزایش می‌یابد که می‌تواند پراکسیداسیون لیپید را ایجاد کند و منجر به روند نزولی فعالیت آنتی‌اکسیدانی سرم شود.
خوشبختانه اکثر لاروهای حشرات دارای ویژگی های هستند
تقویت تغذیه، که از طریق آن ترکیب مواد مغذی آنها با تغییر زیر لایه های کشت تنظیم می شود [48]. منگوز و همکاران [49] دریافتند که ترکیب تقریبی BSFL تازه با استفاده از محصولات جانبی کشاورزی-صنعتی به جای ضایعات آلی به طور قابل توجهی تغییر کرده است. بنابراین، توسعه استراتژی های تقویت تغذیه برای تولید لارو حشرات با کیفیت بالا با مواد مغذی قابل مقایسه در آینده ضروری است.

5. نتیجه گیری
این مطالعه نشان داد که حداقل 50 درصد خوراک تجاری را می توان با BSFL تازه جایگزین کرد بدون اینکه اثرات نامطلوب قابل توجهی بر عملکرد رشد و میزان بقا، فعالیت آنزیم های گوارشی و آنزیم آنتی اکسیدانی داشته باشد.

فعالیت های L. Vannamei. با این حال، سلامت روده میگو با افزایش نسبت BSFL بیش از 50 درصد در رژیم غذایی روزانه به خطر افتاد، که می تواند جایگزینی بالاتر در وعده غذایی ماهی را محدود کند. افزایش تغذیه برای BSFL زنده قبل از تغذیه می تواند برای سلامت روده مفید باشد و با کاهش مصرف پودر ماهی به صنعت پرورش میگو پایدار کمک کند.

در دسترس بودن داده ها
داده های مورد استفاده برای حمایت از یافته های این مطالعه در صورت درخواست از نویسنده مربوطه در دسترس است.

تضاد علاقه نویسندگان هیچ تضاد منافعی را اعلام نمی کنند.

مشارکت نویسندگان
یوهانگ او تمام آزمایش را با کمک یوشنگ جیانگ طراحی و اجرا کرد. یوهانگ او نسخه خطی را تهیه کرد. شین لیو و نایدا ژانگ فعالیت آنزیم های گوارشی و آنتی اکسیدانی را اندازه گیری کردند. Sizhe Wang و Aolin Wang تجزیه و تحلیل آماری داده های اصلی را انجام دادند. دکتر رانتائو زو این نسخه را اصلاح کرد.

قدردانی
مایلیم از پروفسور جیانگوانگ تشکر کنیم
Qin برای مشاوره و نظرات خود در مورد این نسخه خطی. این کار از نظر مالی توسط برنامه ملی تحقیق و توسعه کلیدی چین (گرنت شماره‌های 2020YFD0900202 و 2018YFD0900400) حمایت شد و
پروژه استان لیائونینگ برای انتخاب بهترین نامزدها برای رهبری تحقیقات کلیدی (گرنت شماره 2021JH1/10400040).